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2016年衛(wèi)生資格《檢驗主管技師》預習資料(13)

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  純淋巴細胞群的采集

  通常利用單核細胞在37℃和Ca2+存在條件下,能主動粘附在玻璃、塑料、尼龍毛、棉花纖維或葡聚糖凝膠的特性,據(jù)此建立許多從單個核細胞懸液中去除單核細胞的方法,藉以獲得高純度的淋巴細胞群。

  (一)粘附貼壁法

  將已制備的單個核細胞懸液傾于玻璃或塑料平皿或扁平小瓶中,移至37℃溫箱靜置1h左右,單核細胞和粒細胞均貼于平皿壁上,而未貼壁的非粘附細胞幾乎為純淋巴細胞,繼用橡皮刮下貼壁的細胞即為純單核細胞群。因B細胞也有貼壁現(xiàn)象,用本法分離的淋巴細胞群中B細胞有所損失。

  (二)吸附柱過濾法

  將單個核細胞懸液注入裝有玻璃纖維或葡聚糖凝膠SephadexG10的柱層中,凡有粘附能力的細胞絕大部分被吸附而粘滯在柱層中,從柱上洗脫下來的細胞主要是淋巴細胞。此法簡單易行,對細胞極少損害。

  (三)磁鐵吸引法

  利用單核細胞具有吞噬的特性,在單個核細胞懸液中加直徑為3μm的羰基鐵顆粒,置37℃溫箱內短時旋轉搖動,待單核細胞充分吞噬羰基鐵顆粒后,用磁鐵將細胞吸至管底,上層液中含較純的淋巴細胞。

  含鐵血黃素尿檢查

  含鐵血黃素尿為尿中含有暗黃色不穩(wěn)定的鐵蛋白聚合體,是含鐵的棕色色素。血管內溶血時腎臟在清除游離血紅蛋白過程中,血紅蛋白大部分隨尿排出,產生血紅蛋白尿。其中的一部分血紅蛋白被腎小管上皮細胞重吸收,并在細胞內分解成含鐵血黃素,當這些細胞脫落至尿中時,可用鐵染色法檢出,細胞解體時,則含鐵血黃素顆粒釋放于尿中,也可用Prussian藍反應予以鑒別。

  參考值

  含鐵血黃素定性試驗:陰性(普魯士藍法)

  臨床意義

  尿內含鐵血紅素檢查,對診斷慢性血管內溶血有一定價值,主要見于陣發(fā)性睡眠性血紅蛋白尿癥、行軍性肌紅蛋白尿、自身免疫溶血性貧血、嚴重肌肉疾病等。但急性溶血初期,血紅蛋白檢查陽性,因血紅蛋白尚未被腎上皮細胞攝取,未形成含鐵血黃素,本試驗可呈陰性。

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