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霍亂弧菌的檢驗方法

　　1)直接鏡檢：

　　動力觀察：采取病人“米泔水樣”大便或嘔吐物制成懸滴片，觀察細菌動力，可見流星或穿梭狀動力的細菌。

　　制動試驗：取病人“米泔水樣”大便標本或6小時蛋白胨水增菌液中發現運動活潑的弧菌，可再做一張涂片，加一滴不含防腐劑的霍亂多價診斷血清(效價1：64)，用暗視野鏡觀察，3分鐘內最初活潑的弧菌被凝集，運動被抑制，即為陽性，則可鑒定。

　　涂片染色：取標本涂片2張，干燥后用乙醇固定，分別用革蘭染色及1：10稀釋復紅染色，鏡檢有無革蘭氏陰性，并成魚群狀排列的弧菌。

　　2)細菌分離培養

　　①直接分離培養：急性期患者米泔水樣糞便標本，除增菌外可同時將標本分離培養，常可獲得陽性結果。分離用的培養基有強、弱2種選擇培養基。弱選擇培養基如堿性瓊脂和堿性膽鹽瓊脂，抑制能力弱，糞便中某些雜菌仍可生長。強選擇性培養基常用的有慶大霉素瓊脂等。現多采用堿性蛋白胨水增菌，再用強選擇培養基進行分離。

　　②增菌后分離培養：來自帶菌者或恢復期患者的標本，因含菌量少必須先增菌后分離。可將標本接種于堿性蛋白胨水內，置35℃增菌6-8小時后分離培養，必要時可做二次增菌后再進行分離培養。

　　3)鑒定：

　　根據霍亂弧菌在各種選擇培養基上的特點，挑選可疑菌落進行鑒定。鑒定以血清學(玻片凝集)為主，結合形態學、生化反應作出判斷。必要時作其他試驗以便與其他細菌進行鑒別。

　　①玻片凝集試驗：從分離培養基上挑取可疑菌落于霍亂弧菌多價診斷血清(效價1:32-1:64)作玻片凝集試驗。立即出現凝集者為陽性，同時設生理鹽水和陽性細菌株對照。

　　②形態學檢查：取純培養物涂片革蘭氏染色，觀察菌體形態及染色性。用懸滴法或半固體穿刺法檢測動力。

　　③生化反應：霍亂弧菌氧化酶試驗、吲哚試驗、粘絲試驗和霍亂紅試驗均陽性。

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