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　　抗原抗體反應

　　將抗原(標準品和受檢標本)、標記抗原和抗血清按順序定量加入小試管中，在一定的溫度下進行反應一定時間，使競爭抑制反應達到平衡。不同質量的抗體和不同含量的抗原對溫育的溫度和時間有不同的要求。

　　如受檢標本抗原含量較高，抗血清的親和常數較大，可選擇較高的溫度(15～37℃)進行較短時間的溫育，反之應在低溫(4℃)作較長時間的溫育，形成的抗原抗體復合物較為牢固。

　　抗血清的檢定

　　含有特異性抗體的抗血清是放射免疫分析的主要試劑，常以抗原免疫小動物誘發產生多克隆抗體而得。抗血清的質量直接影響分析的靈敏度和特異性。抗血清質量的指標主要有親和常數、交叉反應率和滴度。

　　1.親和常數親和常數(affinityconstant)常用K值表示。它反映抗體與相應抗原的結合能力。K值的單位為mol/L，即表示 1mol抗體稀釋至若干L溶液中時，與相應的抗原結合率達到50%.抗血清K值越大，放射免疫分析的靈敏度、精密和準確度越佳。抗血清的K值達到 109～1012mol/L才適合用于放射免疫分析。

　　2.交叉反應率放射免疫分析測定的物質有些具有極為類似的結構，例如甲狀腺素的T3、T4，雌激素中的雌二醇、雌三醇等。針對一種抗原的抗血清往往對于其類似物會發生交叉反應。

　　因此交叉反應率反映抗血清的特異性，交叉反應率過大將影響分析方法的準確性。交叉反應率的測定方法為用與抗血清相應抗原及其類似物用同法進行測定，觀察置換零標準管50%時的量。以T3抗血清為例，置換零標準50%T3為1ng，其類似物T4則需 200ng，則其交叉反應率為：1/200=0.5%.

　　3.滴度滴度系指將血清稀釋時能與抗原發生反應的最高稀釋度。它反映抗血清中有效抗體的濃度。在放射免疫分析中滴度為在無受檢抗原存在時，結合50%標記抗原時抗血清的稀釋度。

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