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　　抗原抗體反應(yīng)

　　將抗原(標準品和受檢標本)、標記抗原和抗血清按順序定量加入小試管中，在一定的溫度下進行反應(yīng)一定時間，使競爭抑制反應(yīng)達到平衡。不同質(zhì)量的抗體和不同含量的抗原對溫育的溫度和時間有不同的要求。

　　如受檢標本抗原含量較高，抗血清的親和常數(shù)較大，可選擇較高的溫度(15～37℃)進行較短時間的溫育，反之應(yīng)在低溫(4℃)作較長時間的溫育，形成的抗原抗體復合物較為牢固。

　　抗血清的檢定

　　含有特異性抗體的抗血清是放射免疫分析的主要試劑，常以抗原免疫小動物誘發(fā)產(chǎn)生多克隆抗體而得。抗血清的質(zhì)量直接影響分析的靈敏度和特異性。抗血清質(zhì)量的指標主要有親和常數(shù)、交叉反應(yīng)率和滴度。

　　1.親和常數(shù)親和常數(shù)(affinityconstant)常用K值表示。它反映抗體與相應(yīng)抗原的結(jié)合能力。K值的單位為mol/L，即表示 1mol抗體稀釋至若干L溶液中時，與相應(yīng)的抗原結(jié)合率達到50%.抗血清K值越大，放射免疫分析的靈敏度、精密和準確度越佳。抗血清的K值達到 109～1012mol/L才適合用于放射免疫分析。

　　2.交叉反應(yīng)率放射免疫分析測定的物質(zhì)有些具有極為類似的結(jié)構(gòu)，例如甲狀腺素的T3、T4，雌激素中的雌二醇、雌三醇等。針對一種抗原的抗血清往往對于其類似物會發(fā)生交叉反應(yīng)。

　　因此交叉反應(yīng)率反映抗血清的特異性，交叉反應(yīng)率過大將影響分析方法的準確性。交叉反應(yīng)率的測定方法為用與抗血清相應(yīng)抗原及其類似物用同法進行測定，觀察置換零標準管50%時的量。以T3抗血清為例，置換零標準50%T3為1ng，其類似物T4則需 200ng，則其交叉反應(yīng)率為：1/200=0.5%.

　　3.滴度滴度系指將血清稀釋時能與抗原發(fā)生反應(yīng)的最高稀釋度。它反映抗血清中有效抗體的濃度。在放射免疫分析中滴度為在無受檢抗原存在時，結(jié)合50%標記抗原時抗血清的稀釋度。

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