蛋白質的復性
蛋白質在受到光照、熱、有機溶劑以及一些變性劑的作用時,次級鍵受到破壞,導致天然構象的破壞,使蛋白質的生物活性喪失。如果變性條件劇烈持久,蛋白質的變性是不可逆的。如果變性條件不劇烈,這種變性作用是可逆的,說明蛋白質分子內部結構的變化不大。
這時,如果除去變性因素,在適當條件下變性蛋白質可恢復其天然構象和生物活性,這種現象稱為蛋白質復性(renaturation)。例如胃蛋白酶加熱至80~90℃時,失去溶解性,也無消化蛋白質的能力,如將溫度再降低到37℃,則又可恢復溶解性和消化蛋白質的能力。
濕熱消毒滅菌
濕熱消毒滅菌是由空氣和水蒸氣導熱,傳熱快,穿透力強,濕熱滅菌法比干熱滅菌法所需溫度低、時間短。
(1)煮沸法 將水煮沸至100℃,保持5-10分鐘可殺滅繁殖體,保持1-3小時可殺滅芽胞。在水中加入碳酸氫鈉至1%-2%濃度時,沸點可達105℃,能增強殺菌作用,還可去污防銹。在高原地區氣壓低、沸點低的情況下,要延長消毒時間(海拔每增高300m,需延長消毒時間2分鐘)。此法適用于不怕潮濕耐高溫的搪瓷、金屬、玻璃、橡膠類物品。
煮沸前物品涮洗干凈,打開軸節或蓋子,將其全部浸入水中。大小相同的碗、盆等均不能重疊,以確保物品各面與水接觸。銳利、細小、易損物品用紗布包裹,以免撞擊或散落。玻璃、搪瓷類放入冷水或溫水中煮;金屬、橡膠類則待水沸后放入。消毒時間均從水沸后開始計時。若中途再加入物品,則重新計時,消毒后及時取出物品,保持其無菌狀態。
經煮沸滅菌的物品。“無菌”有效期不超過6小時。
(2)高壓蒸汽滅菌法 高壓蒸汽滅菌器裝置嚴密,輸入蒸汽不外逸,溫度隨蒸汽壓力增高而升高,當壓力增至103-206kPa時,濕度可達121.3-132℃。高壓蒸汽滅菌法就是利用高壓和高熱釋放的潛熱進行滅菌,為目前可靠而有效的滅菌方法。適用于耐高溫、高壓,不怕潮濕的物品,如敷料、手術器械、藥品、細菌培養基等。
潛熱是指當lg100℃的水蒸汽變成lg100℃水時,釋放出2255.2J的熱量。
高壓蒸汽滅菌的關鍵問題是為熱的傳導提供良好條件,而其中最重要的是使冷空氣從滅菌器中順利排出。因為冷空氣導熱性差,阻礙蒸汽接觸欲滅菌物品,并且還可減低蒸汽分壓使之不能達到應有的溫度。
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