(一)病毒分離

　　采取病人唾液，脊髓液及口腔、宮頸、陰道分泌液，或角膜結膜刮取物等接種易感細胞中培養1～2天，出現細胞腫用脹，變圓，相互融合等病變，可作初步診斷。然后用免疫熒光法(IFA)，酶聯免疫吸附試驗(ELISA)進行鑒定，確診HSV。必要時進行分型。

　　(二)抗原檢測

　　同上標本，用IFA、ELISA等方法直接檢測細胞內或分泌液中抗原，快速診斷HSV感染。

　　(三)抗體檢測

　　用補體結合試驗，ELISA檢測病人血清中的抗體，可用于原發感染診斷，但不能與復發感染區別，因人群HSV感染率高，廣泛存在潛伏感染，血清中普遍含較高抗體水平，則復發感染時很難觀察到抗體效價上升。而檢測脊髓液抗體，對神經系統HSV感染有重要意義。

　　此外用DNA分子雜交法和PCR法檢測HSV DNA，已顯示較大優越性。現多用于實驗研究，將在臨床推廣應用。