文章責編:linsen_1989
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酶免疫技術一般分成酶免疫組化技術和酶免疫測定兩大類。酶免疫組化技術與熒光抗體技術相似,酶標記抗體與組織切片上的抗原起反應,然后與酶底物作用,形成有色沉淀物,可以在普通光學顯微鏡下觀察。如酶作用的產物電子密度發生一定的改變,則可用電子顯微鏡觀察,稱為酶免疫電鏡技術。
酶免疫測定根據抗原抗體反應后是否需要分離結合的與游離的酶標記物而分為均相(homogenous)和異相(heterogenous)兩種類型,實際上所有的標記免疫測定均可分成這兩類。如以標記抗體檢測標本中的抗原為例,按照簡單的形式是在試劑抗體過量的情況下進行,其反應式如下:
Ab*+Ag→Ab*Ag+Ab*
Ab*Ag代表結合的標記物,Ab*為游離的標記物。如在抗原反應后,先把Ab*Ag與Ab*分離,然后測定Ab*Ag或Ab*中的標記物的量,從而推算出標本中的抗原量,這種方法稱為異相法。如在抗原抗體反應后Ab*Ag中的標記物*失去其特性,例如酶失去其活力,熒光物質不顯熒光,則不需要進行Ab*Ag與Ab*的分離,可以直接測定游離的Ab*量,從而推算出標本中的Ag含量,這種方法稱為均相法。
在異相法中,抗原和抗體如在液體中反應,分離游離和結合的標記物的方法有好多種。與放射免疫測定相類似的液相異相酶免疫技測定,在某些激素等定量測定中也有應用。但常用的酶免疫測定法為固相酶免疫測定。其特點是將抗原或抗體制成固相制劑,這樣在與標本中抗體或抗原反應后,只需經過固相的洗滌,就可以達到抗原抗體復合物與其他物質的分離,大大簡化了操作步驟。這種被稱為ELISA的檢測技術成為目前臨床檢驗中應用較廣的免疫測定方法。
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