(一)原理

　　斑點免疫層析試驗(dotimmunochromatographicassay，DICA)簡稱免疫層析試驗(ICA)，也以硝酸纖維素膜為載體，但利用了微孔膜的毛細血管作用，滴加在膜條一端的液體慢慢向另一端滲移，猶如層析一般。

　　(二)試劑和操作

　　免疫層析試驗以單克隆雙抗體夾心法為例。試驗所用試劑全部為干試劑，多個試劑被組合在一個約6mm×70mm的塑料板條上，成為一單一試劑條，試劑條上端(A)和下端(B)分別粘貼吸水材料，免疫金復合物干片粘貼在近下端(C)處，緊貼其上為硝酸纖維素膜條。硝酸纖維素膜條上有兩個反應區域，測試區(T)包被有特異抗體，參照區(R)包被有抗小鼠IgG。

　　測定時將試紙條下端浸入液體標本中，下端吸水材料即吸取液體向上端移動，流經C處時使干片上的免疫金復合物復溶，并帶動其向膜條滲移。若標本中有待測特異抗原，其時可與免疫金復合物之抗體結合，此抗原抗體復合物流至測試區即被固相抗體所獲，在膜上顯出紅色反應線條(T)。過剩的免疫金復合物繼續前行，至參照區與固相小鼠IgG結合(免疫金復合物中的單克隆抗體為小鼠IgG)，而顯出紅色質控線條(R)。反之，陰性標本則無反應線條，而僅顯示質控線條。

　　斑點免疫層析試驗在試劑形式和操作步驟上較前述的幾種免疫測定法都更為簡化，只用一個試劑，只有一步操作。