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　　針對尿酮體的常見檢測方法

　　1.試帶法

　　基于傳統(tǒng)的濕化學亞硝基鐵氰化鈉法而設計，是目前臨床上最常用的尿酮體篩檢方法。檢測過程簡易快速，尤其適合于床邊檢驗。應注意不同試帶對丙酮和乙酰乙酸的靈敏度不一。

　　2.濕化學法

　　(1)Rothera法：在堿性條件下，亞硝基鐵氰化鈉可與尿中的乙酰乙酸、丙酮起反應呈現(xiàn)紫色，但不與β-羥丁酸起反應。

　　(2)Gerhardt法：高鐵離子(Fe3+)與乙酰乙酸的烯醇式基團發(fā)生螯合，形成酒紅色復合物。

　　3.片劑法

　　基本原理為亞硝基鐵氰化鈉法。

　　關于間接血凝試驗的具體操作過程說明

　　1.載體

　　紅細胞是大小均一的載體顆粒，最常用的為綿羊、家兔、雞的紅細胞及O凝型人紅細胞。新鮮紅細胞能吸附多糖類抗原，但吸附蛋白質抗原或抗體的能力較差。致敏的新鮮紅細胞保存時間短，且易變脆、溶血和污染，只能使用2～3d.為此一般在致敏前先將紅細胞醛化，可長期保存而不溶血。常用的醛類有甲醛、戊二醛、丙酮醛等。紅細胞經(jīng)醛化后體積略有增大，兩面突起呈圓盤狀。醛化紅細胞具有較強的吸附蛋白質抗原或抗體的能力，血凝反應的效果基本上與新鮮紅細胞相似。如用兩種不同醛類處理效果更佳。也可先用戊二醛，再用鞣酸處理。醛化紅細胞能耐60C的加熱，并可反復凍融不破碎，在4℃環(huán)境中可保存3-6個月，在一20℃的環(huán)境中可保存1年以上。

　　2.致敏

　　致敏用的抗原或抗體要求純度高，并保持良好的免疫活性。用蛋白質致敏紅在低pH，低離子濃度下，用醛化紅細胞直接吸附即可。間接法則需用耦聯(lián)劑將蛋白質結合到紅細胞上。常用耦聯(lián)劑為雙耦氮聯(lián)苯胺(bis-diazotized benzidine，BDB)和氯化鉻。前者通過共價鍵，后者通過金屬陽離子靜電作用使蛋白質與紅細胞表面結合而達到致敏的目

　　3.血凝

　　試驗可在微量滴定板或試管中進行，將標本倍比稀釋，一般為1：64，同時設不含標本的稀釋液對照孔。在含稀釋標本1滴的板孔(或試管)中，加入0.5%致敏紅細胞懸液1滴，充分混勻，置室溫1～2h，即可觀察結果。凡紅細胞沉積于孔底，集中呈1圓點的為不凝集(一)。如紅細胞凝集，則分布于孔底周圍。根據(jù)紅細胞凝集的程度判斷陽性反應的強弱，以抖凝集的孔為滴度終點。

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