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細菌培養基的組成成分

  培養基的組成成分包括三大類:營養物質、凝固物質、抑制劑和指示劑。

  (一)營養物質

  盡管不同的細菌對營養的要求不同,但細菌需要的營養物質應含有水、氮源、碳源、無機鹽類和生長因子等,常用的營養物質

  1.蛋白胨:蛋白胨是制備培養基時最常用的成分之一,提供細菌生長繁殖所需要的氮源。是動物或植物蛋白質經酶或酸堿分解而成。植物胨和動物胨各有優點,配制培養基常將兩者按一定比例混合使用,提高培養基的營養價值。蛋白胨易溶于水,遇酸不沉淀,不因受高溫而凝固,并為兩性電解質有緩沖作用。但吸水性強,應注意干燥密封保存。

  2.肉浸液:是用新鮮牛肉浸泡、煮沸而制成的肉汁。其中含有可溶性含氮浸出物(肌酸、黃嘌呤、腺嘌呤、次黃嘌呤核苷酸、谷氨酸、甘氨酸等)和非含氮浸出物(肝糖、乳酸、琥珀酸、磷酸己糖、脂肪、無機鹽類等)。還有一些生長因子。肉浸液可為細菌提供氮源和碳源,但肉浸液中所含氮物質過少而不能滿足細菌的需要,因此在制備培養基時應再加入1%~2%的蛋白胨和0.5%氯化鈉。

  3.牛肉膏:由肉浸液經長時間加熱濃縮而制成。糖類在加熱過程中被破壞,所以其營養價值低于肉浸液,但因無糖可用作腸道桿菌鑒別培養基的基礎成分。由于使用方便,常用于制備培養基。

  4.糖類、醇類:為細菌生長提供碳源和能源。制備培養基所用的糖類、醇類有多種,常用的糖類有單糖(葡萄糖、阿拉伯糖等)、雙糖(乳糖、蔗糖等)和多糖(淀粉、菊糖等);常用的醇類有甘露醇、衛茅醇等。除葡萄糖、蔗糖主要作為碳源和能源的基本成分外,其他糖類和醇類主要用于鑒定細菌所做的發酵反應。

  5.血液:血液中既含有蛋白質、多種氨基酸、糖類、無機鹽類等營養物質,又能提供輔酶(如V因子)、血紅素(X因子)等特殊生長因子,所以培養基中加入血液用于培養營養要求較高的細菌。另外,還可根據細菌在血液培養基中的溶血現象而進行鑒定。

  6.無機鹽類:提供細菌生長的各種元素,如:鉀、鈉、鐵、鎂、鈣、磷、硫等。用于制備培養基的無機鹽類有多種,其中最常用的有氯化鈉和磷酸鹽,前者對維持酶的活性、調節菌體內外的滲透壓非常重要,后者是細菌良好的磷源,并在培養基中具有緩沖作用。

  7.雞蛋和動物血清:雖然不是構成培養基的基本成分,但卻是某些細菌生長所必需的營養物質,所以僅用于制備一些特殊的培養基,這些細菌直接從雞蛋和動物血清中獲取營養。如培養結核分枝桿菌的雞醫學教,育網整理蛋培養基和培養白喉桿菌的呂氏血清培養基等。

  8.生長因子:是細菌生長所必需的,但需要量很小。在制備培養基時,常在肝浸液、肉浸液、酵母浸液和含血液培養基中加入維生素、氨基酸、嘌呤、嘧啶等生長因子。

  (二)凝固物質

  制備固體培養基時,需要在液體中加入凝固物質。最常用的凝固物質為瓊脂,特殊情況下也可用明膠、卵白蛋白、血清等。

  瓊脂是從石花菜中提取出來的一種半乳糖膠,當溫度達98℃以上時可溶于水,在45℃以下則凝固成凝膠狀態,是一種理想的固體培養基賦形劑。因其不被細菌分解利用,故無營養作用。

  (三)抑制劑和指示劑

  在制備培養基時常加入抑制劑和指示劑,這些并不是細菌生長繁殖所必需的物質,而是由于選擇、鑒定及判斷結果的需要。

  1.抑制劑:抑制劑必須具有選擇抑制作用,在制備培養基時加入一定種類的抑制劑,目的在于抑制非檢出菌(非病原菌)的生長,以利于檢出菌(病原菌)的生長。抑制劑的種類很多,可醫學教,育網整理根據不同的目的選用不同的抑制劑。常用的有膽鹽、煌綠、亞硫酸鈉、亞硒酸鈉及一些染料和某些抗生素等。

  2.指示劑:在培養基中加入一定種類的指示劑,是為了便于觀察細菌是否利用和分解培養基中的糖、醇類。常用的有酚紅、中性紅、甲基紅、溴甲酚紫、溴麝香草酚藍、中國藍等酸堿指示劑。美藍常用作氧化還原指示劑。

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文章責編:guofengru  
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