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尿有形成分的檢測方法

  (一)檢查方法

  尿沉渣是尿有形成分經(jīng)離心沉淀、在顯微鏡下見到的尿有形成分。這些成分可來自腎臟或尿道脫落的細胞、形成的管型、結(jié)晶和感染的微生物、寄生蟲等。

  尿沉渣檢查可以彌補尿理、化檢查不足造成的漏診,對輔助泌尿系統(tǒng)疾病的定位診斷、鑒別診斷及預(yù)后判斷等有重要意義。目前,尿有形成分檢查常用的方法除了傳統(tǒng)一般光學顯微鏡檢查法和儀器檢查法之外,還有特殊顯微鏡的檢查,主要有:

  1.相差顯微鏡法:是以光的衍射和干涉現(xiàn)象照整理射標本,產(chǎn)生明暗不同的反差進行識別,有助于辨別透明管型、不典型紅細胞、新鮮尿中血小板。

  2.偏振光顯微鏡法:利用光的偏振特性對具有雙折射性的物體進行鑒別,如可顯示鹽類結(jié)晶的精細結(jié)構(gòu)。

  3.透射電鏡法:利用電子束作為“照明波源”可明顯提高分辨率,將尿沉渣標本切成超薄片在電子顯微鏡下觀察,可準確分辨出細菌管型、白色念珠菌管型、血小板管型、粗顆粒管型和細顆粒管型等。

  (二)方法學評價

  1.顯微鏡檢查:目前,尿沉渣檢查雖可用尿沉渣分析儀進行定性或定量檢查。但迄今為止,仍無任何一種儀器可以完全代替顯微鏡檢查,尿沉渣顯微鏡檢查仍然是一種方法簡便、價廉、結(jié)果最可靠的檢查方法,尿沉渣顯微鏡檢查同時也是最重要參考方法。

  (1)直接鏡檢法:簡便但陽性率低,重復(fù)性差,易漏診。僅適用于急診有明顯混濁血尿、膿尿的檢查。

  (2)離心法:敏感陽性率高,但操作較整理繁瑣費時。國內(nèi)外對臨床尿沉渣檢查方法,已制定了標準化操作程序。

  (3)定量尿沉渣計數(shù)板法:使尿沉渣檢查更符合標準化的要求。

  (4)染色法:有助于識別細胞、管型等。

  1)Sternheirner-Malbin(SM)染色法:為常用的染色方法,能辨別管型尤其是透明管型及各種形態(tài)的紅細胞、上皮細胞,并能區(qū)別存活及死亡的中性粒細胞和檢出閃光細胞。

  2)巴氏染色法:觀察有形成分的微細結(jié)構(gòu),對泌尿道腫瘤細胞和腎移植排異反應(yīng)具有診斷意義。

  3)其他特殊染色:

  ①尿沉渣結(jié)合細胞化學染色、熒光抗體染色和酶免疫化學染色法:可清晰地辨別各種細胞、管型的形態(tài)結(jié)構(gòu)。②細胞過氧化物酶染色:根據(jù)粒細胞含過氧化物酶的特點,可鑒別不典型的紅細胞與白細胞,并可區(qū)別中性粒細胞管型及腎上皮細胞管型。③酸性磷酸酶染色:可區(qū)分透明管型與顆粒管型。④阿利新藍、中性紅等混合染色:可辨別白細胞種類和細胞存活情況;區(qū)分正常紅細胞、小紅細胞、影紅細胞及上皮細胞、管型種類。

  (5)偏振光顯微鏡檢查:可識別脂肪管型中的脂肪成分,如膽固醇酯,在管型的黑色背景中嵌有大小不等的明亮球體,中心為黑色的十字架形狀,又稱馬爾他“十字”;鑒別和確認尿沉渣中各種結(jié)晶。

  2.儀器法: 靈敏度較、重復(fù)性好,速度快,效率高;但目前尿沉渣分析儀特異性仍有待提高。

  (三)質(zhì)量控制

  影響尿沉渣檢驗結(jié)果的因素較多,如尿酸堿度和滲透壓的影響(表1-8-1)。因此,必須強調(diào)尿沉渣檢查質(zhì)量控制。

表1-8-1 尿酸堿度和滲透壓對有機沉渣物的影響

  

有形成分

紅細胞

白細胞

管型

高滲尿
低滲尿
酸性尿
堿性尿
皺縮,體積變小,星形或桑葚狀
膨脹,體積變大,不定形,無色
可存在一定時間體積縮小
溶解破裂,形成褐色顆粒
體積縮小
膨脹,易破壞整理
體積變小,能存在一定時間
膨脹,形成塊狀結(jié)構(gòu)
可存在較久
易崩裂
可存在較久
溶解,崩潰

  1.標本采集:一般宜用新鮮、隨機中段尿。要避免污染。盡量不加防腐劑。詳細可參照“尿標本采集”。

  2.使用標準器材: 如一次性清潔干燥容器、標準尿離心管、尿沉渣定量分析板等。

  3.采用可靠尿沉渣質(zhì)控物: 如無質(zhì)整理控品,也可用患者新鮮尿標本作重復(fù)性試驗進行考核。

  4.我國尿沉渣檢查標準化要求:

  ①標準化操作:取尿10mL離心,采用水平式離心機,有效離心半徑15cm1500r/min,相對離心力(RCF)400g,離心5min。手持離心管45°~90°棄除上層尿,保留0.2ml尿沉渣,輕輕混勻后,取1滴(大約50μL)置載玻片上,用18mm18mm或22mm22mm的蓋玻片覆蓋后(注意防止產(chǎn)生氣泡)鏡檢。首先在低倍鏡視野(1010)下觀察尿沉渣分布的情況,再轉(zhuǎn)高倍鏡視野(1040)仔細觀察細胞;檢查細胞,應(yīng)觀察10個高倍視野,檢查管型,應(yīng)在觀察20個低倍鏡視野,分別記錄每個視野的細胞和管型數(shù),計算平均值報告;

  如數(shù)量過多可報告有形成分所占視野的面積情況,如1/3視野、1/2視野、滿視野等。報告形式為:細胞xx/HPF;管型:XX/LPF。②建議逐步實行尿沉渣定量板法報告方式(xx/μL);還可采整理用尿沉渣分析工作站檢查法,該法通過蠕動泵自動定量將尿沉渣吸入,并自動懸浮在流動池內(nèi),鏡檢后自動沖洗并定量報告,此2種方法均可實行標準化。

  5.與各種尿化學分析法互相參照。

  6.加強與臨床聯(lián)系。

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