（一）溫度

　　各種細菌都需在最適生長溫度的范圍內(nèi)生長。當外界溫度明顯高于最適生長溫度，細菌被殺死；如果在低于細菌的最低生長溫度時，細菌代謝活動受抑制，則出現(xiàn)抑菌作用。

　　1.高溫：細菌蛋白質(zhì)、核酸、細胞壁和細胞膜及酶類因熱力作用發(fā)生變性或凝固，活性消失，代謝發(fā)生障礙導致細菌死亡。大多數(shù)無芽胞細菌55℃～60℃加熱30～60min即被殺死；加熱100℃立即死亡，有芽胞的破傷風芽胞梭菌需煮沸3h才被殺死。熱力滅菌分濕熱和干熱兩種。在同一溫度下，前者的效力大于后者醫(yī)學教.育網(wǎng)。

　　（1）濕熱：常用的方法有

　　1）巴氏消毒法：方法有兩種：一是61.1℃～62.8℃30min；另一是71.7℃l5～30s，目前主要用于牛乳消毒。

　　2）煮沸法：煮沸100℃（1個大氣壓狀態(tài)下）。5min中可殺死細菌繁殖體，如于水中加入2％碳酸鈉，則可提高其沸點至105℃，既殺死芽胞，又防止金屬器皿生銹。

　　3）流通蒸氣滅菌法：常用阿諾（Arnold）流通蒸氣滅菌器或蒸籠。利用一個大氣壓下100℃水蒸氣進行消毒。經(jīng)10～30min細菌繁殖體被殺死，但對芽胞的作用不大醫(yī)學教.育網(wǎng)。

　　4）間歇滅菌法：采用間歇加熱方式達到滅菌目的。方法是將待滅菌物品置于Arnold滅菌器內(nèi)，經(jīng)l00℃加熱15～30min，每日一次，連續(xù)3次。每次滅菌后，取出再置37℃孵箱過夜，使殘存的芽胞發(fā)育成繁殖體，次日再通過流通蒸氣加熱使之被殺死。這樣可達到殺死芽胞又使不耐100℃的物質(zhì)保存下來。

　　5）加壓蒸汽滅菌法：利用密閉的耐高壓的高壓蒸汽滅菌器，在蒸汽不外溢的條件下，使鍋內(nèi)壓力增高，蒸汽的溫度也隨之增高，大大加強其殺菌效力。通常在103.4kPa的壓力下達121.3℃，維持15～20min可殺滅所有細菌芽胞和繁殖體。本法適用于耐高溫、耐濕物品的滅菌，如普通培養(yǎng)基、生理鹽水、手術(shù)敷料等。

　　（2）干熱

　　1）燒灼：是常用的干熱滅菌法。微生物實驗室使用的接種環(huán)、接種針、瓶口和試管口常在火焰上燒灼滅菌。

　　2）干烤：在密閉干烤箱內(nèi)加溫至160℃～170℃維持2h是對一般玻璃器皿、注射器、瓷器的滅菌方法，適用于高溫下不變質(zhì)、不損壞、不蒸發(fā)的物品醫(yī)學教.育網(wǎng)。

　　2.低溫：一般細菌耐低溫，在低溫條件下，細菌代謝活動降低不再繁殖，能較長時間維持生命，故常用于保存菌種。為避免解凍時對細菌的損傷，可在低溫狀態(tài)下真空抽干，去盡水分，此法稱冷凍真空干燥法，可保存細菌數(shù)年至數(shù)十年，是目前保存菌種的最好方法。

　　（二）光線和射線

　　隨光線和射線的波長、強度、作用距離、持續(xù)時間而影響它們對細菌的作用。

　　1.日光和紫外線：發(fā)揮殺菌作用的日光主要是紫外線，波長265～266nm時殺菌作用最強。這是由于紫外線使DNA分子形成胸腺嘧啶雙聚體，干擾DNA正常復制，導致細菌死亡。此外紫外線可使分子氧變成臭氧，后者具有殺菌能力。殺菌波長的紫外線對人體皮膚、眼角膜等均有損傷作用，使用時應注意防護。

　　人工紫外線用低壓水銀蒸氣燈產(chǎn)生，照射的能量以單位時間內(nèi)每平方厘米的微瓦數(shù)（μw）計算。一支15W的紫外燈在1m內(nèi)傳遞38μw.s／cm2射線。無芽胞菌一般的致死量為1800～6500μw.s／cm2，殺死芽胞則需該劑量的10倍。

　　2.電離輻射：微生物體中的水受電離照射后產(chǎn)生的自由基及自由基離子破壞微生物核酸、酶和蛋白質(zhì)致微生物死亡，適用于不耐熱物品的滅菌。如X線、γ射線、高速電子等。

　　（三）超聲與超聲波

　　不被人耳感受的高于20千周／秒的聲波稱超聲波。殺菌機制是超聲波通過液體時發(fā)生的空腔化作用破壞了原生質(zhì)的膠體狀態(tài)，導致細菌死亡。一般用于細胞的粉碎以提取細胞組分和抗原制備醫(yī)學教.育網(wǎng)。

　　（四）濾過除菌

　　濾過是以物理阻留方法將液體或空氣中的微生物除去。所用的器具為濾器。濾器中的微孔只允許液體或氣體中小于濾孔孔徑的物質(zhì)通過。濾器中的復層網(wǎng)狀微孔結(jié)構(gòu)通過毛細管阻留、篩孔阻留和靜電吸附綜合作用達到除菌效能。

　　濾器的種類很多，目前常用的有薄膜濾器。用于除菌的濾膜孔徑為0.22μm.另外以石棉板為濾板的金屬濾器稱Seitz濾器（蔡氏濾器），按其濾孔大小分成三種：K型濾孔最大，澄清用；EK-S濾孔最小，可阻止大病毒通過；EK濾孔居中，用以去除一般細菌。全由玻璃制成的玻璃濾器分成G1～G6六種。G5、G6兩型能阻止細菌通過。

　　（五）干燥

　　許多細菌的繁殖體在空氣中干燥時可以死亡。干燥引起細菌脫水、蛋白質(zhì)變性和鹽類濃縮，因而妨礙細菌的代謝、生長、繁殖而引起細菌死亡。各種細菌對干燥的抵抗力不同，肺炎鏈球菌、腦膜炎奈瑟菌較小；鏈球菌、葡萄球菌與結(jié)核桿菌等較大；芽孢抵抗力最大。含于飛沫或痰液中的細菌，因受有機物的保護，可以抵抗干燥，此與呼吸道感染的傳布有關(guān)。食物經(jīng)曬干、烘干、風干等干燥后，水分減少，不適于細菌等繁殖，因而可延長食物的保存時間，起到防腐作用。