(一)特異性
抗原抗體的結合實質上是抗原表位與抗體超變區中抗原結合點之間的結合。由于兩者在化學結構和空間構型上呈互補關系,所以抗原與抗體的結合具有高度的特異性。這種特異性如同鑰匙和鎖的關系。例如白喉抗毒素只能與相應的外毒素結合,而不能與破傷風外毒素結合。但較大分子的蛋白質常含有多種抗原表位。如果兩種不同的抗原分子上有相同的抗原表位,或抗原、抗體間構型部分相同,皆可出現交叉反應。
(二)按比例
在抗原抗體特異性反應時,生成結合物的量與反應物的濃度有關。無論在一定量的抗體中加入不同量的抗原或在一定量的抗原中加入不同量的抗體,均可發現只有在兩者分子比例合適時才出生現最強的反應。以沉淀反應為例,若向一排試管中中入一定量的抗體,然后依次向各管中加入遞增量的相應可溶性抗原,根據所形成的沉淀物及抗原抗體的比例關系可繪制出反應曲線(圖9-1)。從圖中可見,曲線的高峰部分是抗原抗體分子比例合適的范圍,稱為抗原抗體反應的等價帶(zoneofequivalence)。在此范圍內,抗原抗體充分結合,沉淀物形成快而多。其中有一管反應最快,沉淀物形成最多,上清液中幾乎無游離抗原或抗體存在,表明抗原與抗體濃度的比例最為合適,稱為最適比(optimalratio)。在等價帶前后分別為抗體過剩則無沉淀物形成,這種現象稱為帶現象(zonephenomenon)。出現在抗體過量時,稱為前帶(prezone),出現在抗原過剩時,稱為后帶(postzone)。
關于抗原抗體結合后如何形成聚合物,曾經有過不少解釋。結合現代免疫學的成就呼電鏡觀察所見,仍可用Marrack(1934)提出的網格學說(latticetheory)加以說明。因為大多數抗體的巨大網格狀聚集體,形成肉眼可見的沉淀物。但當抗原或抗體過量時,由于其結合價不能相互飽和,就只能形成較小的沉淀物或可溶性抗原抗體復合物。
在用沉淀反應對不同來源的抗血清進行比較后,發現抗體可按等價帶范圍大小分為兩種類型,即R型抗體和H型抗體。R型抗體以家兔免疫血清為代表,具有較寬的抗原抗體合適比例范圍,只在抗原過量時,才易出現溶性免疫復合物,大多數動物的免疫血均屬此型。H型抗體以馬免疫血清為代表,其抗原與抗體的合適比例范圍較窄,抗原或抗體過量,均可形成可溶性免疫復合物。人和許多大動物的抗血清皆屬H型。
(三)可逆性
抗原抗體反應遵循生物大分子熱動力學反應原則,其反應式為:
[Ab-Ag]/[Ab].[Ag]=k1/k2=k
式中各反應項的單位以mol表示,k1表示反應速度常數,k2為逆反應速度常數,K是反應平衡時的速度常數。由上式可知,K值是反映抗原抗體間結合能力的指示,所以抗體親和力通常以K值表示。
抗原抗體復合物解離取決于兩方面的因素,一是抗體對相應抗原的親和力;二是環境因素對復合物的影響。高親和性抗體的抗原結合點與抗原表位的空間構型上非常適合,兩者結合牢固,不容易解離。反之,低親和性抗體與抗原形成的復合物較易解離。解離后的抗原結合牢固,不容易解離。反之,低親和性抗體與抗原形成的復合物較易解離。解離后的抗原或抗體均能保持未結合前的結構、活性及特異性。在環境因素中,凡是減弱或消除抗原抗體親和力的因素都會使逆向反應加快,復合物解離增加。如pH改變,過高或過低的pH值均可破壞離子間電引力消失。對親合力本身較弱的反應體系而言,僅增加離子強度即可解離抗原抗體復合物的目的;增加溫度可增加分子間的熱動能,加速已結合的復合物的解離,但由于溫度變化易致蛋白變性,所以實際工作中極少應用。改變pH和離子強度是最常用的促解離方法,免疫技術中的親和層析就是以此為根據純化抗原或抗體。
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