檢測人T細胞的特異性抗原，曾采用抗人腦、抗人胸腺細胞和抗人T細胞等抗血清，通過細胞毒試驗或免疫熒光染色加以鑒定。自抗白細胞分化抗原的單克隆抗體問世以來，上述諸多方法均被新方法取而代之。常用以鑒定和檢測計數T細胞的表面分化抗原如表21-1所示。

　　表21-1 T胞表面主要CD抗原及其特異性

　　用單克隆抗體檢測T細胞表面抗原的方法有兩大類，一類是用標記抗體著染，如免疫熒光法、酶免疫法、生物素-親和素(或鏈霉親和素)系統的ABC法以及免疫金銀染色法;另一類是用抗體致敏的紅細胞作花環試驗。兩類方法各有優缺點。以下敘述有代表性的方法。

　　(一)間接免疫熒光法

　　本法是將分離獲得的外周血單個核細胞分別與抗相應CD的單克隆抗體(如CD2、CD4、CD8)結合后，洗去游離的抗體，繼加熒光素標記的抗小鼠IgG抗血清，經溫育結合后，洗去多余的標記抗體，取樣制片，用熒光顯微鏡觀察并計數約200個單個核細胞，以熒光陽性細胞與計數細胞總數之比，求得相應CD抗原陽性的T百分率。如有條件，細胞經熒光標記抗體著染后，用流式細胞儀計數，快速而準確，但需要較多的投資，難以普及應用。

　　(二)免疫細胞化學法

　　通常用酶免疫檢測法，如APAAP酶免疫橋聯法。為減少非特異性著染，可選用生物素-鏈霉親和素系統試劑作ABC法染色。該類方法可用普通顯微鏡觀察，凡呈棕黃色的細胞為相應CD抗原陽性細胞，計其占總淋巴細胞的百分率。本法簡便易行，不需特殊儀器，一般試驗室均可采用。

　　(三)抗體致敏細胞花環法

　　用相應的CD單克隆抗體致敏醛化的紅細胞作為指示物，它與受檢的細胞混勻后，置室溫片刻，繼經低速離心，移放室溫作短期溫育或4℃過夜后，重懸取樣涂片染色鏡檢。凡受檢細胞周圍粘附有3個或更多紅細胞的判為花環形成細胞，共計數100～200個細胞，以花環形成數與計數細胞總數之比為相應CD抗原陽性細胞的百分率。本法需有相應的致敏紅細胞試劑，受影響的因素較前兩法多。