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2013醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)臨床化學(xué)輔導(dǎo)精華:堿性磷酸酶(ALP)

  堿性磷酸酶(ALP)是指一組底物特異性很低,在堿性環(huán)境中能水解很多磷酸單酯化合物的酶,需要鎂和錳離子為激活劑。近年為認(rèn)為ALP真正作用是將底物中磷酸基團(tuán)轉(zhuǎn)移到另一個(gè)含羥基基團(tuán)化合物上,磷酸乙醇胺有可能是ALP在體內(nèi)作用的底物。

  ALP確切的生理作用目前仍不十分清楚,一般認(rèn)為骨中ALP和骨的鈣化作用密切相關(guān),成骨細(xì)胞中的ALP作用產(chǎn)生磷酸,與鈣生成磷酸鈣沉積于骨中。ALP還廣泛存在于肝細(xì)胞血竇側(cè)和膽小管膜上、腎近側(cè)曲管刷狀緣和小腸粘膜的微絨毛,據(jù)此推測(cè)它可能還與物質(zhì)的吸收和運(yùn)轉(zhuǎn)過(guò)程有關(guān)。

  各器官的ALP在理化性質(zhì)都有些差異,臨床上長(zhǎng)期認(rèn)為存在著肝、骨、小腸和胎盤(pán)等ALP,在病理時(shí)還可能出現(xiàn)“高分子”ALP,以及一些和腫瘤有關(guān)的變異ALP,如Regan、NagaoALP等。深一步研究發(fā)現(xiàn)這些ALP主要受3個(gè)基因位點(diǎn)控制,相應(yīng)生成3大類(lèi)ALP,即小腸、胎盤(pán)和組織非特異ALP,后者包括臨床上所謂的骨、肝、腎等組織器官,它們的氨基酸結(jié)構(gòu)類(lèi)似,抗原性無(wú)差別,這些酶電泳速率和對(duì)不同抑制劑反應(yīng)差異來(lái)自ALP中所含糖基的不同。

  【組織分布】

  ALP廣泛存在于機(jī)體各組織器官中,按每克濕組織ALP含量多少排列,順序?yàn)楦、腎、胎盤(pán)、小腸、骨等。

  【生理變異】

  總論中已經(jīng)提到ALP變化與年齡密切相關(guān),簡(jiǎn)言之,新生兒ALP略高于成年人,以后逐漸增高,在1-5歲有一次高峰,可達(dá)成年人上限2.5-5倍,以后下降,到兒童身長(zhǎng)增高期又再次上升,第二高峰在10-15歲之間,可達(dá)成人上限4-5倍。20歲后降至成年人值,到老年期又輕度升高,可能與生理性的激素變化有關(guān)。

  孕婦血清ALP在妊娠3個(gè)月即開(kāi)始升高,9個(gè)月可達(dá)峰值,約為正常值的2倍,ALP升高可維持到分娩后1個(gè)月,升高的ALP來(lái)自胎盤(pán),和胚泡壁的細(xì)胞滋養(yǎng)層的發(fā)育程度直接相關(guān)。

  高脂餐后,血清ALP活性升高,尤以血型為O型或B型的分泌型(唾液中可分泌血型抗原者)人群更為突出,增高的ALP多為小腸ALP。

  【標(biāo)本的采集、處理和貯存】

  為避免脂肪餐的影響,宜空腹采血,除肝素外,其它常用抗凝劑可與Mg2+作用,引起ALP活性下降。最好用血清為測(cè)定標(biāo)本,紅細(xì)胞膜上有ALP,明顯溶血標(biāo)本會(huì)干擾測(cè)定結(jié)果。

  ALP在室溫和冰箱放置后,活性逐漸升高,可增加5%-10%。冷凍血清融凍后,其中活性開(kāi)始偏低,以后慢慢升高。所以應(yīng)在采血當(dāng)日就測(cè)定ALP活性。

  目前常用的凍干質(zhì)控血清,復(fù)溶后ALP活性常有一個(gè)活性升高過(guò)程,有些制品復(fù)溶24小時(shí)后,活性可升高50%-100%,使用時(shí)應(yīng)加以注意。

  【參考值范圍】

  ALP測(cè)定結(jié)果與所用方法種類(lèi)和測(cè)定溫度密切相關(guān),就是同一底物,因緩沖液不同,其結(jié)果可有2-3倍差異,目前國(guó)內(nèi)應(yīng)用較多的方法中以磷酸對(duì)硝基酚為底物,2-氨基-2-甲基丙醇為緩沖液,在37℃測(cè)定時(shí),成年人參考值范圍為20-110U/L。

  ALP在不同年齡人群中有較大差異,在以上有關(guān)章節(jié)中已加以論述,解釋結(jié)果時(shí)必須加以注意。國(guó)外文獻(xiàn)指出ALP雖然有較大的人群差異,但是個(gè)體間差異很小。有條件應(yīng)將測(cè)定結(jié)果與被測(cè)者的“正常值”進(jìn)行比較。

  【臨床應(yīng)用】

  ALP早在本世紀(jì)30年代就用于臨床,是臨床醫(yī)師非常熟悉的酶之一,在70年代前ALP是世界上臨床測(cè)定次數(shù)最多的酶,主要用于骨骼和肝膽系統(tǒng)疾病的診斷和臨床鑒別診斷,可參見(jiàn)下表:

  表7-7 堿性磷酸酶在疾病時(shí)的變化

  (缺)

  ALP和骨化過(guò)程密切相關(guān),很多骨骼疾病如變形性骨炎(Paget病)、副甲狀旁腺功能亢進(jìn)、佝僂病、軟骨癥、原發(fā)性和繼發(fā)性骨腫瘤、骨折和肢端肥大癥的患者血中ALP都可升高,尤其是變形性骨炎,增高非常明顯,可達(dá)正常上限值的50倍。此病在我國(guó)少見(jiàn),我國(guó)常用于早期診斷佝僂病和軟骨病,ALP升高早于血鈣、磷變化以及X線(xiàn)檢查,是一個(gè)很靈敏的診斷指標(biāo),但應(yīng)注意骨質(zhì)疏松患者血中ALP一般都在正常范圍內(nèi)。

  目前ALP測(cè)定主要用于黃疸的鑒別診斷,阻塞性黃疸時(shí)血清ALP常早期明顯升高,甚至可達(dá)正常上限值的10-15倍,在完全阻塞性黃疸病例中,80%病例血中ALP超過(guò)正常上限5倍。一般而言血清ALP持續(xù)低于正常上限值2倍時(shí),阻塞性黃疸可能性較小,肝性黃疸時(shí)ALP輕度升高,一般不超過(guò)正常上限的2-3倍,約有半數(shù)原發(fā)性肝癌血中ALP升高,升高程度也常較明顯,甚至可達(dá)正常上限值的15-20倍。如在無(wú)黃疸肝臟疾病人血中發(fā)現(xiàn)有ALP升高應(yīng)警惕有無(wú)肝癌可能。

  ALP升高還可見(jiàn)于其它疾病,如急慢性胰腺炎、慢性腎衰、腸梗塞、肺梗塞等疾病,但無(wú)太大臨床價(jià)值,某些藥物如孕激素、雌激素、胎盤(pán)白蛋白等也可引起血中ALP升高。

  血ALP下降見(jiàn)于甲狀腺功能低下、惡性貧血和遺傳性堿性磷酸酶減少癥等。

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