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　　香豆素的物理性質與顯色反應

　　1.熒光性質：呋喃香豆素多顯藍色熒光，熒光性質常用于色譜法檢識香豆素。

　　2.顯色反應

　　(1)異羥肟酸鐵反應：由于香豆素類具有內酯環，在堿性條件下可開環，與鹽酸羥胺縮合成異羥肟酸，然后再在酸性條件下與三價鐵離子絡合成鹽而顯紅色。

　　(2)三氯化鐵反應：具有酚羥基的香豆素類可與三氯化鐵試劑產生顏色反應，通常是藍綠色。

　　(3)Gibb‘s反應：Gibb’s試劑是2，6-二氯(溴)苯醌氯亞胺，它在弱堿性條件下可與酚羥基對位的活潑氫縮合成藍色化合物。

　　(4)Emerson反應：試劑是氨基安替比林和鐵氰化鉀，它可與酚羥基對位的活潑氫生成紅色縮合物。

　　Gibb‘s反應和Emerson反應都要求必須有游離的酚羥基，且酚羥基的對位要無取代才顯陽性，如7-羥基香豆素就呈陰性反應。判斷香豆素的C-6位是否有取代基的存在，可先水解，使其內酯環打開生成一個新的酚羥基，然后再用Gibb’s或Emerson反應加以鑒別，如為陽性反應表示C-6無取代。同樣，8-羥基香豆素也可用此反應判斷C-5位是否有取代。

　　香豆素的提取及分離

　　1.水蒸氣蒸餾法：小分子的香豆素類因具有揮發性，可采用水蒸氣蒸餾法進行提取。

　　2.堿溶酸沉法：由于香豆素類可溶于熱堿液中，加酸又析出，故可用0.5%氫氧化鈉水溶液(或醇溶液)加熱提取，提取液冷卻后再用乙醚除去雜質，然后加酸調節pH至中性，適當濃縮，再酸化，則香豆素類或其苷即可析出。

　　3.系統溶劑法：從中藥中提取香豆素類化合物時，可采用系統溶劑提取法。常用石油醚、乙醚、乙酸乙酯、丙酮和甲醇順次萃取。石油醚對香豆素的溶解度并不大，其萃取液濃縮后即可得結晶。乙醚是多數香豆素的良好溶劑，但亦能溶出其他可溶性成分，如葉綠素、蠟質等。其他極性較大的香豆素和香豆素苷，則存在于甲醇或水中。

　　4.色譜方法：結構相似的香豆素混合物最后必須經色譜方法才能有效分離，柱色譜吸附劑可用中性和酸性氧化鋁以及硅膠，堿性氧化鋁慎用。其他色譜方法還有制備薄層色譜、氣相色譜、高效液相色譜等。

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