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平板劃線分離法簡介
平板劃線分離法是接種環在平板培養基表面通過分區劃線而達到分離微生物的一種方法。其原理是將微生物樣品在固體培養基表面多次作“由點到線”稀釋而達到分離目的。
(1)倒平板溶化牛肉膏蛋白胨瓊脂培養基倒平板,水平靜置待凝。
(2)在酒精燈光焰上灼燒接種環,待冷,取一接種環金黃葡萄球菌、大腸桿菌混合菌液。
(3)左手握瓊脂平板稍抬起皿蓋,同時靠近火焰周圍,右手持接種環伸入皿內,在平板上一個區域作之形回劃線,劃線時例接種環與平板表面成30-40°角度輕輕接觸,以腕力在表面作輕快的滑動,勿使平板表面劃破或嵌進增基內。
(4)灼燒接種杯,以殺滅接種環上尚殘余的菌液,待冷卻后,再將接種環伸入皿內,在第一區域劃過線的地方稍接觸一下后,轉動90°,在第二區域繼續劃線。
(5)劃畢后再灼燒接種杯,冷卻后用同樣方法在其他區域劃線。
(6)全部劃線完畢后,在平皿底用特種蠟筆注明菌種、日期、組別、姓名。將整個培養皿倒置放入恒溫培養箱。
(7)37℃經過24-48小時培養后取出觀察。注意菌落的開關、大小、顏色、邊緣、表面結構、透明度等性狀。
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