文章責編:dongmingman
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高效液相色譜法(High Performance Liquid Chromatography \ HPLC)又稱“高壓液相色譜”、“高速液相色譜”、“高分離度液相色譜”、“近代柱色譜”等。高效液相色譜是色譜法的一個重要分支,以液體為流動相,采用高壓輸液系統,將具有不同極性的單一溶劑或不同比例的混合溶劑、緩沖液等流動相泵入裝有固定相的色譜柱,在柱內各成分被分離后,進入檢測器進行檢測,從而實現對試樣的分析。該方法已成為化學、醫學、工業、農學、商檢和法檢等學科領域中重要的分離分析技術。
高效液相色譜法
(一)速率理論
高效液相色譜法中影響柱效主要因素為渦流擴散項和傳質阻抗項。由于液體黏度比載氣大得多,而且柱溫多為室溫,其縱向擴散項很小,可忽略不計。范氏方程簡化為 H=A +Cμ 。
(二)高效液相色譜儀
1.高壓輸液泵
2.色譜柱:分析型和制備型
3.進樣閥
3.檢測器:①固定波長檢測器;②可變波長檢測器;③光二極管陣列檢測器
(三)應用
高效液相色譜法,只要求試樣能制成溶液,而不需要氣化,因此不受試樣揮發性的限制。對于高沸點、熱穩定性差、相對分子量大(大于400以上)的有機物(這些物質幾乎占有機物總數的75%~80%)原則上都可應用高效液相色譜法來進行分離、分析。據統計,在已知化合物中,能用氣相色譜分析的約占20%,而能用液相色譜分析的約占70~80%。
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