點擊查看：2020年檢驗技師《臨床檢驗基礎》復習考點匯總

　　瑞氏染色法染液的配制

　　(1) 瑞氏染液配制：

　　瑞氏染料 830gm 或 1g

　　甲醇( AR ) 500ml 或 600ml

　　先稱干燥(事先放入溫箱干燥過夜)瑞氏染料放置乳缽內， 用乳棒輕輕 敲碎染料成粉末，再行研磨至聽不到 研芝麻聲 即呈細粉末，加少許甘油或甲醇溶解研磨，使染料在乳缸內顯“一面鏡”光澤，而無染料粉粒沉著，再加較多量甲醇研磨呈一面鏡光亮，靜置片刻，將上層液體倒入 一 清潔儲存瓶內(最好用甲醇空瓶)，再加甲醇研磨，重復數次，直至乳缽內染料及甲醇用完為止，搖勻，密封瓶口，存室溫暗處，儲存愈久，則染料溶解、分解就越好，一般儲存 3 個月以上為佳。

　　(2) 緩沖液：

　　1) 緩沖液作用：染色對氫離子濃度是十分敏感的，據觀察 pH 值的改變，可使蛋白質與染料形成的化合物重新離解。 緩沖液須保持 一定的 pH 使染色穩定， PBS 的 pH 一般在 6.4~6.8 ，偏堿性染料可與緩沖液中 酸基起 中和作用，偏酸性染料則與緩沖液中的堿基起中和作用，使 pH 恒定。

　　2) 緩沖液配制( pH6.4~6.8 ，弱酸性)：

　　配方 1 ： 配方 2 ：

　　1% KH2PO4 30ml M/15 KH2PO4 73.5 ml

　　1% Na2HPO4 20ml M/15 Na2HPO4 26.5ml

　　H2O( 新鮮 ) 加至 1000ml

　　置室溫黑暗處，瓶口密封，防止霉菌污染，如有污染則應報廢。

　　瑞氏染色法的基本步驟

　　1.滴加瑞氏吉姆薩A液(約0.5ml-0.8ml)涂片上，并讓染液覆蓋整個標本染色1min;

　　2. 再將瑞氏吉姆薩B液加于A液上面(滴加量為A液的2-3倍)，以嘴或洗耳球吹出微風使液面產生漣漪狀，使兩液充分混合，染色3-10min.(染血片時間可略短，染骨髓片時間應視細胞量多少而異)

　　3.水洗(沖洗時不能先倒掉染液，應以流水沖去，以防有沉渣沉淀在標本上)，干燥、鏡檢。

　　瑞氏染色法操作時的注意事項

　　1. 染色時間須視何種標本，涂片厚度，有核細胞多少，何種細胞及室溫等而定;通常染血液涂片時滴加B液后染2-4分鐘，染骨髓片則應不少于8分鐘;氣溫較低時，可適當延長染色時間。染色結果如出現嗜酸性粒細胞變堿，則考慮是否染色時間太長所致。

　　2.做骨髓涂片時，因為骨髓纖維蛋白含量較高，凝固較快，所以涂片過程要快。骨髓不可用草酸鹽抗凝，否則會使血細胞核變形，核染色質致密，胞漿空泡形成，出現草酸鹽結晶。

　　3.染液量需充足，勿使染液蒸發干燥，以防染料沉著于涂片上。

　　4.做細胞染色時，當天氣寒冷或濕度較大時，應于37℃溫箱中保溫促干，以免細胞變形縮小或在染色時脫片。

　　5.染料放置時間越長，染色效果越好。

　　6. 本試劑應由專業人員使用。

　　血細胞染色—吉姆薩染色法

　　吉姆薩(Giemsa)染色法吉姆薩染液由天青，伊紅組成。染色原理和結果與瑞特染色法基本相同。嗜酸性顆粒為堿性蛋白質，與酸性染料伊紅結合，染粉紅色，稱為嗜酸性物質;細胞核蛋白和淋巴細胞胞漿為酸性，與堿性染料美藍或天青結合，染紫藍色，稱為嗜堿性物質;中性顆粒呈等電狀態與伊紅和美藍均可結合，染淡紫色，稱為中性物質。

　　PH對細胞染色有一些影響。細胞里各種成分均不蛋白質，因為蛋白質系兩性電解質，帶電荷隨溶液PH而定，在偏酸性環境里正電荷增多，易和伊紅結合，染色為偏紅;在偏堿性環境里負電荷增多，易和美藍或天青結合，染色偏藍。所以細胞染色對氫離子濃度十分敏感，染色用正經片一定清潔，要無酸堿污染。配制頊特液一定用優質甲醇，稀釋染色一定用緩沖液，沖洗一定用水應近中性，不然可導致各種細胞染色反應異常，以致于識別困難，甚至造成錯誤的。

　　一般性操作技術血涂片制備;細胞染色;顯微檢查;血液病診斷;染色不良。

掃描/長按二維碼可幫助備考衛生資格考試

了解2020衛生資格資訊

下載10頁精華點題講義

下載歷年衛生真題試卷

了解2020衛生資格試題

衛生資格萬題庫下載丨微信搜"萬題庫衛生資格考試"

　　相關推薦：

　　2020年衛生資格考試復習資料匯總(各專業)

　　2020年衛生資格考試各專業精選試題及答案匯總

　　衛生資格考試《各專業》歷年真題及答案匯總

　　2020衛生資格考試大綱 | 衛生資格考試教材 | 學習經驗技巧