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2013年藥學類考試生物化學輔導:蛋白質的沉淀

  1.蛋白質的膠體性質:蛋白質分子顆粒大小在1~100nm膠體范圍之內。維持蛋白質溶液穩定的因素有兩個:

  (1)水化膜:蛋白質顆粒表面大多為親水基團,可吸引水分子,使顆粒表面形成一層水化膜,從而阻斷蛋白質顆粒的相互聚集,防止溶液中蛋白質的沉淀析出。

  (2)同種電荷:在pH≠pI的溶液中,蛋白質帶有同種電荷。pH>pI,蛋白質帶負電荷;pH

  2.沉淀蛋白質的方法:

  ①鹽析法:在蛋白質溶液中加入大量的硫酸銨、硫酸鈉或氯化鈉等中性鹽,破壞蛋白質的水化膜和中和電荷,使蛋白質顆粒相互聚集,發生沉淀。

  ②丙酮沉淀法:使用丙酮沉淀時,必須在0~4℃低溫下進行,丙酮用量一般10倍于蛋白質溶液體積,蛋白質被丙酮沉淀時,應立即分離,否則蛋白質會變性,除了丙酮以外,也可用乙醇沉淀。

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