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　　固相膜免疫測定

　　一、A1

　　1、以下屬于固相膜的技術相關的是

　　A、孔徑

　　B、流速

　　C、蛋白質結合力

　　D、均一性

　　E、以上都是

　　2、下列關于免疫滲濾試驗敘述錯誤的是

　　A、免疫滲濾試驗(IFA)用于檢測各種傳染病的抗體和腫瘤標志物等

　　B、斑點金免疫滲濾試驗(DIGFA)是將抗原或抗體點加在固相載體硝酸纖維素薄膜上

　　C、斑點金免疫滲濾試驗(DIGFA)抗原抗體反應后，形成大分子膠體金復合物，從而使陽性結果在膜上呈現紅色斑點

　　D、斑點金免疫滲濾試驗(DIGFA)簡化了操作步驟，成為床邊檢驗(POCT)的主要方法之一

　　E、斑點金免疫滲濾試驗(DIGFA)除試驗盒本身外，還需要一些儀器設備輔助

　　3、固相膜免疫測定中最為常用的固相膜是

　　A、玻璃纖維素(fiberglass)膜

　　B、尼龍(nylon)膜

　　C、聚偏氟乙烯(PVDF)膜

　　D、硝酸纖維素(NC)膜

　　E、以上都不是

　　4、當前免疫電鏡技術中應用最廣的標記物是

　　A、辣根過氧化物酶

　　B、硝酸銀

　　C、膠體金

　　D、鐵蛋白

　　E、SPA

　　5、下列關于免疫印跡中需要注意的問題錯誤的是

　　A、影響免疫印跡成敗的一個主要因素是抗原分子中可被抗體識別的表位的性質

　　B、免疫印跡實驗中常選用單克隆抗體

　　C、有若干種方法常用于提高免疫印跡的靈敏度，一種是在電泳之前應用免疫沉淀法將抗原進行純化和濃縮

　　D、IBT法在臨床應用中存在一定的局限性

　　E、本法綜合了SDS-PAGE的高分辨力和ELISA法的高特異性和敏感性，是一個有效的分析手段

　　6、關于免疫印跡法下列錯誤的是

　　A、免疫印跡法(IBT)亦稱酶聯免疫電轉移印跡法

　　B、IBT是在蛋白質電泳分離和抗原抗體檢測的基礎上發展起來的一項檢測蛋白質的技術

　　C、它將SDS-聚丙烯酞胺凝膠電泳的高分辨力與抗原抗體反應的高特異性相結合

　　D、第一階段為SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳

　　E、第三階段為電轉移。此階段分離的蛋白質條帶肉眼可見

　　7、免疫金制備時通常用到的高分子穩定劑有

　　A、葡聚糖

　　B、PEG2000

　　C、明膠

　　D、BSA

　　E、以上都是

　　8、下列有關斑點金免疫滲濾試驗雙抗體夾心法的敘述中，錯誤的是

　　A、以硝酸纖維素膜為載體

　　B、用膠體金標記抗原

　　C、首先滴加純化的抗體試劑(首先用純化的抗體固定在硝酸纖維素膜上)

　　D、膜中央出現紅色斑點即為陽性反應

　　E、斑點顏色的深淺可提示陽性的強弱

　　9、制備膠體金常用的還原劑有

　　A、枸櫞酸鈉

　　B、鞣酸

　　C、維生素C

　　D、白磷

　　E、以上都是

　　10、下列有關膠體金特性的敘述中，錯誤的是

　　A、膠體金顆粒穩定、均勻地分散懸浮在液體中

　　B、電解質可使膠體金沉淀

　　C、較大顆粒的膠體金是橙黃色的

　　D、蛋白質有保護膠體金穩定性的作用

　　E、膠體金顆粒越小，其吸收波長越短

　　參考答案：

　　一、A1

　　1、

　　【正確答案】 E

　　【答案解析】 以上選項均是固相膜的技術要求方面。

　　2、

　　【正確答案】 E

　　【答案解析】 斑點金免疫滲濾試驗(DIGFA)除試驗盒本身外，不需要任何儀器設備。

　　3、

　　【正確答案】 D

　　【答案解析】 固相膜免疫測定中常用的膜為玻璃纖維素(fiberglass)膜、尼龍(nylon)膜、聚偏氟乙烯(PVDF)膜和硝酸纖維素(NC)膜等。其中最常用為NC膜。

　　4、

　　【正確答案】 C

　　【答案解析】 膠體金標記免疫電鏡技術是利用膠體金在堿性環境中帶有負電的性質，使其與抗體相吸附，從而將抗體標記。

　　5、

　　【正確答案】 B

　　【答案解析】 影響免疫印跡成敗的一個主要因素是抗原分子中可被抗體識別的表位的性質。只有那些能識別耐變性表位的抗體可與抗原結合，多數多克隆抗血清中或多或少地含有這種類型的抗體，所以在免疫印跡實驗中常選用多克隆抗體。

　　6、

　　【正確答案】 E

　　【答案解析】 免疫印跡法第一階段為SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)。第二階段為電轉移。此階段分離的蛋白質條帶肉眼仍不可見。第三階段為酶免疫定位。將印有蛋白質條帶的硝酸纖維素膜(相當于包被了抗原的固相載體)依次與特異性抗體和酶標第二抗體作用后，加入能形成不溶性顯色物的酶反應底物，使區帶染色。

　　7、

　　【正確答案】 E

　　【答案解析】 免疫金制備多種蛋白質、葡聚糖、PEG2000、明膠等均為良好的高分子穩定劑，PEG和BSA是最常用的穩定劑。

　　8、

　　【正確答案】 B

　　【答案解析】 斑點金免疫滲濾試驗雙抗體夾心法中，用膠體金標記的是抗體。

　　9、

　　【正確答案】 E

　　【答案解析】 除以上選項外，硼氫化鈉也是常用還原劑。

　　10、

　　【正確答案】 C

　　【答案解析】 最小的膠體金顆粒(2～5nm)是橙黃色的，中等大小的顆粒(10～20nm)是橙色的，較大顆粒(30～80nm)則是紫紅色的。

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