文章責編:陶玉良
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初級藥士/藥師考試輔導:基因的轉化
轉化是受體菌直接攝取供體菌游離的DNA片段,通過與染色體重組,獲得了供體菌的部分遺傳特性。轉化的DNA可以是細菌溶解后釋放的,也可用人工方法抽提而獲得。
轉化首先在1928年由Griffith在肺炎球菌中發現,以后在葡萄球菌、嗜血桿菌也先后被發現。Griffith 的實驗為:以無毒的Ⅱ型粗糙型(無莢膜)肺炎球菌注入小白鼠,并不引起動物死亡;以有毒力的Ⅲ型光滑型(有莢膜)肺
圖5-4 細菌間的基因轉移、轉化、轉導、接合
炎球菌注入小白鼠后,動物則死于全身性感染,以加熱殺死的Ⅲ型光滑型肺炎雙球菌注入小白鼠后,動物不死亡,亦分離不到Ⅲ型光滑型肺炎雙球菌。如果將活的Ⅱ型粗糙型肺炎球菌與殺死的Ⅲ型光滑型肺炎球菌混合后注入小白鼠,結果動物發生全身性感染而死亡,自動物體內可分離到活的Ⅲ型光滑型肺炎球菌。以后直到1944年Avery才證實轉化的物質是DNA,因可被DNA酶所破壞。以后的試管內培養條件下進行實驗,發現細菌在攝取外源DNA時,需處于感受態(Competence)。肺炎球菌的感受態是在對數生長后期,約持續40分鐘。進入受體菌的DNA片段需有與受體菌染色體上的同源核酸片段才能發生重組。當上述實驗中Ⅲ型光滑型肺炎球菌產生莢膜的DNA片段與Ⅱ型粗糙型肺炎球菌的染色體DNA發生重組后,后者即可分裂產生具有Ⅲ型莢膜的光滑型有毒力的肺炎球菌子代。在自然條件下細菌通過轉化獲得外源性DNA發生遺傳型變異的機會是存在的,但不一定多見。
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