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第 1 頁:第一節(jié) 薄層色譜法 |
第 2 頁:第二節(jié) 氣相色譜法和高效液相色譜法 |
第 3 頁:第三節(jié) 電泳法 |
第三節(jié) 電泳法
熟悉電泳法的基本原理和常用的電泳方法。
了解毛細(xì)管電泳法的基本原理。
一、基本原理
電泳遷移速度 ν=μE
在相同電場強(qiáng)度下,兩組分分離程度取決于二者淌度之差。電泳分離后各組分的相對位置由組分的電泳泳動和緩沖液電滲共同決定。
影響電泳分離的條件包括:
1.緩沖液的pH值和離子強(qiáng)度:pH直接影響組分的荷電情況,是電泳分離的最重要條件。離子強(qiáng)度太小則緩沖容量不足,區(qū)帶易擴(kuò)散;太大則組分移動慢,發(fā)熱嚴(yán)重。
2.電場強(qiáng)度:電場強(qiáng)度越大分離越完全,大于20V/cm時發(fā)熱嚴(yán)重。
3.樣品濃度:通常以1%為宜。太濃拖尾,太稀測定結(jié)構(gòu)精密度差。
二、各類電泳法
1.紙電泳法 2.醋酸纖維素電泳法 3.瓊酯糖凝膠電泳法 4.聚丙烯酰胺凝膠電泳法 5.SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳法
三、毛細(xì)管電泳法
以彈性石英毛細(xì)管為分離通道,以高壓直流電場為驅(qū)動力,依照樣品中各組分之間淌度和分配行為的差異而實現(xiàn)分離的方法。
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